25241是苯酚氯仿异戊醇，因为密度不一样，也就是重力不一样，有机试剂比水重，所以会分层，另外上层液还起到保护作用，使用时取下层液即可。

上层是水氯仿使有机相和水相易分层，增加核酸得率，同时可除去脂类1 说明从核酸样品中除去蛋白质时常常使用苯酚氯仿异戊醇25 24 1氯仿可使蛋白质变性并有助于液相与有机相的分离，而异戊醇则有助于消除抽提过程中出现的气泡2 配制方法将TrisHCl平衡苯酚与等体积的氯仿异。

Tris饱和酚分上相tris和下相即有机相酚，这样保存可以避免酚的挥发以及防止酚类氧化成醌，抽提时取下层酚相在吸取的时候要将枪头插到水相以下的酚相若吸到的是上层tris溶液，它会与我们的上清互溶不过一般都不会单独使用酚，而是将酚与氯仿异戊醇混合25241取与上清等体积的混合液。

按道理来讲应该是蛋白了，一般用酚氯仿抽提DNA时最后上层是含DNA的水相，中间是蛋白，下层是有机溶剂对比你说的结果，应该是这样的。

除杂质加等体积氯仿异戊醇混合液，充分震荡10分钟， 8000 rmin离心7分钟，取上层液量好体积，倒入烧杯中离心管，加同体积的氯仿异戊醇混合液，重复上次操作直至界面不出现蛋白凝胶为止沉淀准确量取上清液体积，加2倍体积95％冷乙醇，搅拌后，置冰箱静止冷却，待有白色丝状物出现，约10。

TE 饱和的酚氯仿异戊醇25 241氯仿异戊醇24 1移液器和移液头 二步骤 DNA样品中加入等体积的TE饱和的酚氯仿，对于15 ml 的微量离心管，总体积不应超过500 μI 剧烈振荡20 s 样品在室温离心5 min， 分相，这个步骤不需要很高的转速，但是通常用最高转速比较方便小心。

加入异戊醇能降低分子表面张力，所以能减少抽提过程中的泡沫产生一般采用氯仿与异戊酵为241之比也可采用酚氯仿与异戊醇之比为25241在抽提DNA时，为了混合均匀，必须剧烈振荡容器数次，这时在混合液内易产生气泡，气泡会阻止相互间的充分作用。

1组织细胞裂解液 100~200μgml 蛋白酶K 10mmolL Tris－ClpH8001molL EDTA pH8005% SDS 20 μgml RNase A 2平衡酚用05mmolL Tris－Cl饱和，pH80，3氯仿异戊醇241vv43molL乙酸钠NaAc，pH525冷无水乙醇。